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QIAGEN總RNA小量提取試劑盒RNeasy Mini Kit 74104 74106

RNeasy Mini Kit可從細(xì)胞、組織或酵母中快速純化高品質(zhì)RNA，硅膠膜RNeasy離心柱的結(jié)合能力達(dá)100 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的穩(wěn)定組織樣本，使用TissueRuptor或TissueLyser體系可有效的破碎組織。可在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀上應(yīng)用RNeasy Mini Kit實(shí)現(xiàn)RNA純化自動(dòng)化。處理更小或更大的樣本，可使用RNeasy Micro Kit（離心柱結(jié)合能力為45 µg RNA）、RNeasy Midi Kit（離心柱結(jié)合能力為1 mg RNA）和RNeasy Maxi Kit（離心柱結(jié)合能力為6 mg RNA）。

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Principle

RNeasy Mini Kit可從少量的樣本中高效純化總RNA。RNeasy純化技術(shù)整合了苯酚/異硫氰酸胍裂解的嚴(yán)謹(jǐn)性和硅膠膜純化的速度和純度，簡(jiǎn)化了總RNA純化技術(shù)。純化得到高品質(zhì)的RNA，并且DNA殘留水平達(dá)到zui低。

Procedure

RNeasy Mini Kit可從10–1 x 10⁷個(gè)動(dòng)物或人類(lèi)細(xì)胞中、0.5–30 mg動(dòng)物或人類(lèi)組織中或小于5 x 10⁷個(gè)酵母細(xì)胞中方便的純化總RNA。先對(duì)樣本進(jìn)行破碎和勻漿。在裂解物中加入乙醇以提供合適的結(jié)合條件。然后將裂解物上樣至RNeasy硅膠膜（參見(jiàn)"RNeasy Mini spin column"）。RNA結(jié)合到膜上（zui多可結(jié)合100 µg），污染物被高效洗去。對(duì)于某些對(duì)少量DNA十分敏感的RNA應(yīng)用，可在RNeasy操作過(guò)程中進(jìn)行柱上DNA酶處理，去除DNA殘留。之后可在30–100 µl的純水洗脫液中得到高濃度的純化RNA（參見(jiàn)"RNeasy Mini procedure"）。還有各種特殊應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)方案可供選擇。

Applications

使用RNeasy技術(shù)純化得到的RNA的A_260/280比為1.9–2.1（10 mM Tris­·Cl、pH 7.5的溶液中），適用于多種下游應(yīng)用，包括：

• Northern印跡、點(diǎn)印跡和狹縫印跡
• 終點(diǎn)式RT-PCR
• 定量real-time RT-PCR
• 芯片分析
• Poly A+ RNA篩選

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